基质胶在3D细胞培养、类器官研究、肿瘤形成、细胞侵袭及血管生成等实验中充当“支架”的角色。然而,从解冻到铺板、从浓度选择到结果判读,稍有不慎就可能导致实验失败。基于上万次实验反馈,尊龙凯时生物科技整理出这份“避坑指南”,助您轻松上手,获取可靠的实验数据。
问题与建议
尊龙凯时建议在收到产品后,如何进行保存?将基质胶置于-20℃环境中保存;如果是短期存放,可以在4℃下保存不超过7天。
关于反复冻融的问题,不建议进行反复冻融;首次融化后应立即分装(建议200µL/管),并保存于-20℃。如何进行融化?可以将冷冻状态的基质胶在操作前一天埋藏于碎冰中,然后转移到4℃冰箱,次日即可使用。适当延长在4℃的融化时间,可以有效减少基质胶中的气泡产生。
类型及特点
这款基质胶的应用场景丰富多样,含酚红的基质胶适合常规实验使用,酚红在不同的温度和pH下会改变颜色,从明黄色到暗红色不等。而对于颜色检测的实验,则推荐使用不含酚红的基质胶,特别是在子宫内膜细胞培养中。需注意,酚红可能作为一种潜在的内分泌干扰物,影响实验动物体内的激素生成与代谢。
标准浓度的蛋白浓度在8-12mg/mL之间,适合Transwell实验和皮下成瘤实验;而高浓度则为18-22mg/mL,适合困难细胞系的肿瘤形成。此外,针对类器官培养及血管生成场景,我们对标准浓度基质胶进行了生长因子处理以提高实验效果。
高频问题解决锦囊
在进行皮下成瘤实验时,荷瘤不成功的原因可能是使用的细胞处于对数生长期,建议细胞密度达到80-90%左右。应选择4-6周龄的裸鼠,过小或过大的小鼠对成瘤效果都有影响。对于肿瘤生长后消失的情况,可能是小鼠自身的炎症反应导致的,建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠。
在血管生成成管实验中,如果细胞不能形成连续的网格,建议使用状态良好且融合度达到70%-80%的HUVEC细胞,并确保细胞数量充足,通常4-18小时内可观察到血管生成现象。
对于类器官实验,传代标准因类器官的不同而有所差异,通常在7-14天、直径达到100-200μm时可进行传代。形态鉴定可通过显微镜和H&E染色进行,进一步可用免疫荧光检测类器官是否表达相应的生物标志物。
关于观察到的形态与文献不一致的情况,影响类器官形态的因素有很多,包括样本来源及所用细胞因子的品质等。
产品信息
尊龙凯时提供多种规格的基质胶,具体信息如下:
- Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶 货号40183ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号40184ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix GFR,LDEV-Free基质胶 货号40185ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号40186ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix High Concentration,LDEV-Free基质胶 货号40187ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号40188ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free基质胶 货号40189ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free基质胶 货号40190ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号40191ES 规格:15mL/5mL/10mL
- Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus基质胶 货号40192ES 规格:15mL/5mL/10mL