胎牛血清的常规储存温度为-20℃，若需长期保存，建议使用-80℃。在解冻过程中，不建议将其直接放置于常温（25-37℃）中，这样容易产生絮状沉淀，进而影响血清的质量。理想的解冻方式是先将血清从-20/-80℃转移到4℃，待其完全液化后，再转移至室温。在解冻过程中，需时常摇晃，以确保血清成分均匀混合，降低沉淀的产生风险。解冻完成后，可将血清分装于15mL或50mL的无菌离心管中进行冻存。根据使用频率，可以在4℃保存一管已解冻的血清，以便于频繁配制培养基，但应在一个月内使用完。解冻后的胎牛血清不宜在37℃或室温下长时间存放，以免导致重要细胞生长因子失活，影响细胞状态。

一般而言，血清的添加量不宜过多，通常使用5%、10%或20%的浓度。大多数细胞的正常培养推荐使用10%血清，而部分细胞在初代提取时则可使用20%的血清。具体某一细胞适应的血清浓度，需要根据细胞特性及实验目的进行适当调整。这里引入了一个概念——热灭活。热灭活一般采用56℃，保持30分钟的方式处理已解冻的血清，以去活化补体。补体参与的反应包括：溶细胞活性、平滑肌收缩、肥大细胞和血小板的组胺释放、增强吞噬作用以及淋巴细胞和巨噬细胞的趋化和激活。

除了特定实验外，对于常规细胞培养，热灭活通常不是必要的步骤。经过热灭活处理的血清对细胞生长的促进作用较小，甚至高温可能会影响血清质量，导致细胞生长速率下降和沉淀物增加。细胞培养过程中，常常需要更换血清。如果不加注意，使用新款血清直接培养细胞，可能会导致细胞增殖速度减缓，甚至脱落死亡。这种情况常常是因为细胞对原有培养环境的适应，突如其来的营养环境变化，即使是质量更好的血清也会造成不适配。因此，在更换血清时，应遵循渐进式替换的原则，确保细胞能逐步适应新环境。

在开始使用新血清时，如果是复苏细胞，建议使用原培养体系进行复苏，待细胞状态恢复后再进行测试。在测试时，尽量避免一次性将培养基100%更换为新血清，应采取比例梯度替换，例如首次更换按照新旧体系1:3，第二次1:1，第三次3:1，最终完全替换。对于一些对培养体系敏感的细胞，替换比例应进一步细化。

解冻后若发现少量乳白色的絮状或点状物质，主要是血清中脂蛋白变性及解冻带来的纤维素，这些絮状物不会影响血清本身的质量。此时可通过400×g离心5分钟取上清，而对细胞影响不大。一般情况下，生产厂家提供的血清是无菌的，通常无需额外过滤除菌。如有悬浮物，可将血清加入培养液中一同过滤，但切勿直接过滤血清。

在细胞培养过程中，若发现黑点形成，首先需通过肉眼观察培养基是否混浊，黑点是否存在不规则游动的情况。如果细胞出现污染，微生物会大量繁殖，培养基会迅速变黄和混浊。污染来源可能包括细菌或支原体等。如果在显微镜下观察细胞，发现其生长状态良好，且与黑点出现前未有任何变化，黑点的出现可能与以下几种情况有关：(1)细胞生长过程中的细胞残骸；(2)血清中的杂蛋白，尤以反复冻融为显著因素；(3)培养基水质或容器的合格性问题；(4)原代细胞中出现的小黑点可能源自于组织内杂质，通常多次传代可加以消除。

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