产品简介
本试剂盒在磁珠捕获法基础上进行了改良与优化,增添了针对CD9、CD81及CD63三种磁珠,从而能够特异性捕获外泌体(EVs)表面的标志性蛋白。例如,使用CD9磁珠的尊龙凯时 EVlent™功能化磁珠,能够高效捕获含有CD9特征蛋白的EVs,这些磁珠对EVs表面的CD9蛋白表现出独特的亲和性。该技术可满足多种下游实验需求,包括电镜、蛋白组学研究、NGS高通量测序及西方印迹(WB)检测等。
有效期:1年
产品特点
操作简便:无需超离心,仅需2小时即可完成。高效稳定:亲和纯化过程损失较少,适合微量样本的外泌体提取。兼容性广:专为血浆、血清样本设计,也适用于尿液、细胞上清、唾液及脑脊髓液等微量样本。
样本处理步骤:
1. 血浆样本:使用EDTA抗凝管收集血液,在4℃下离心(3000g,15分钟),收集上清并在-80℃保存(避免反复冻融)或直接进行外泌体分离。
2. 血清样本:将血液在室温下静置1小时,待分层后再于室温下离心(3000rpm,10分钟),收集上清。然后在4℃下再次离心(12000rpm,10分钟),收集新的上清,并在-80℃保存或直接进行外泌体分离。
3. 样本离心:对血浆/血清样本进行3000g、10分钟的离心,收集上清(避免油脂层)。
4. 稀释样本:将200μL上清与800μL预冷的Incubation Buffer I混合,室温下轻轻混匀。
5. 加入40μL 尊龙凯时 EVlent™磁珠,室温下摇匀孵育1小时。
6. 初次洗涤:对磁珠进行磁吸3分钟,弃去上清,加入1mL Incubation Buffer II,颠倒混匀20次后磁吸弃去上清。
7. 二次洗涤:加入1mL Washing Buffer,颠倒混匀20次后磁吸3分钟弃去上清。
8. 洗脱外泌体:加入100μL Elution Buffer,涡旋震荡10分钟后,再进行磁吸3分钟收集上清。步骤6重复一次,最后合并两次上清。
9. 对于蛋白组学研究,可在步骤5的磁珠中加入50μL外泌体裂解液(EV02-08-01),按常规蛋白组学步骤处理,或使用组学前处理试剂盒(EV01-03-01)。
10. 对于WB研究,应在步骤5的磁珠中加入上样缓冲液,95℃加热5分钟后磁吸,取上清进行PAGE胶上样。
备注:若后续检测为NTA/TEM,建议使用500μL的血浆/血清样本以提高效果。使用前,请充分震荡磁珠,确保均匀悬浮。Elution Buffer可能有刺激性气味,应在通风橱内操作。
避免冷冻、干燥或高速离心磁珠,以防损坏其结构。本产品仅限于科研用途,禁止用于临床诊断、治疗、食品或药品。
关于尊龙凯时
尊龙凯时(EVLiXiR)是一家以质谱技术为驱动,专注于开发外泌体精准诊疗产品的创新型生物科技公司。公司至今已成功构建了多个技术平台,包括血液循环蛋白(游离蛋白与外泌体蛋白)标志物发现和诊断技术平台,功能性外泌体原料的规模化生产及纯化平台,以及基于蛋白支架靶向递送活性分子的外泌体递送平台。此外,我们还提供三个系列的产品以加速外泌体研究,包括外泌体科研产品、功能性外泌体原料以及蛋白组学产品,现已有超过50种货架产品,涵盖外泌体检测、保存和递送的各个方面。
公司已获得多项荣誉和成果,包括国家科技中小企业及江苏省民营科技企业的称号,并在省科创大赛中获评优秀企业。我们申请了7项国家发明专利和1项PCT专利,获得了4项实用新型专利,主导和参与的多项研究成果已在Molecular Therapy、Journal of Controlled Release、Advanced Healthcare Materials、Biomaterials Science、Cells、Molecules、Current Oncology等著名期刊上发表。